TCR-T 疗法是指利用其表面经过修饰的 T 细胞受体（TCR）分子，精准靶向表达肿瘤特异性抗原的肿瘤细胞，最终下达杀伤指令，消灭癌细胞。TCR-T 不仅能识别细胞表面的肿瘤特异性抗原，还能识别细胞内的肿瘤特异性抗原或肿瘤相关抗原，这使其在治疗实体瘤方面具有优势。
TCR 通过识别并结合肿瘤细胞表面的抗原肽-人类白细胞抗原复合物（pHLA）为 T 细胞开启免疫监视功能提供了第一信号，而 TCR 结合 pHLA 的亲和力决定了 TCR-T 细胞免疫治疗的效果。
作为中美日三国药典收录的分子互作技术，Biacore 这一互作「金标准」自然而然成为了国内外药企进行 TCR 研究的必备手段，其应用涵盖了包括 TCR 筛选、亲和力表征、亲和力改造等诸多环节。
图 1，中国药典 2020 版关于 SPR 的部分截图
一
TCR 筛选
鼠源 TCR 亲和力较高，来源简单，但免疫原性限制了它的应用。香雪制药通过将鼠源 TCR 的
CDR 区移植到稳定性优化的人源可变区骨架上，从而保证了人源化 TCR 识别抗原的特异性和亲和
力。研究人员结合 Biacore 分子互作技术和噬菌体展示技术，基于结合强弱筛选得到了亲和力更高
的人源化 TCR 突变体，其中 A32E6-B32 G3 比最初鼠源 SRm1 的亲和力提高了 500 倍。
后续的细胞实验表明：
二
TCR 表征分析与改造
英国 Immunocore 公司
2020 年，英国 Immunocore 公司开发了 3 个针对睾丸癌抗原 NY-ESO-1157–165–HLA-A2 的 TCR 分子（NYE_S1,NYE_S2,NYE_S3）。研究人员需要对 TCR 分子进行生物物理性质分析，其中 Biacore 技术被用于 TCR 的结合活性表征，该核心数据展示了其 TCR 分子良好的亲和力和特异性。
图 3， Biacore 表征 TCR 分子的结合活性
英国 Avidex 公司
英国 Avidex 公司为了优化并获得与疾病多肽有更强作用的 TCR 分子，使用噬菌体展示技术先在体外优化了一系列的带有点突变的 TCR CDR 区域，然后表达纯化了 TCR 的细胞外可溶区域，对它们与疾病多肽-MHC 复合体进行准确的分子互作分析。 实验结果发现这些分子相互之间的亲和力分别为 2.5nM 和 26pM，大大强于野生型，原因主要是由于分子的解离速率的减慢。Biacore 技术可以准确地对不同 TCR 分子突变体与抗原多肽的亲和力进行表征分析，很好的与 T 细胞反应实验和动物实验结合来优化 TCR-T 的构建。 图 4， TCR 改造前后亲和力变化
英国 Adaptimmune 公司
英国 Adaptimmune 公司开发了一种针对 MAGE-A10 的 TCR 筛选方法。研究人员首先筛选了三个母体 TCR 分子（c672, c728 和 c740），随后对其 CDR 区域进行了改造，部分改造实现了超过 15 倍的亲和力增强。借助 Biacore 技术，改造前后的亲和力效果一目了然。 图 5， Adaptimmune 公司采用 Biacore 技术完成 TCR 改造
三
细胞水平直接检测
Biacore 对检测对象无分子量限制，可以涵盖大到细胞、病毒，小到小分子、片段等几乎所有
的分子类型。在 TCR 开发中，还可以利用 Biacore 直接检测 T 细胞与疾病多肽-MHC 复合体的结
合，帮助研究人员判断 TCR-T 的识别情况。Biacore 可直接将 T 细胞通过共价偶联包被在芯片上，
之后流过多肽复合体完成检测。检测过程中，Biacore 连续流系统极大地保证了细胞的完整性，避
免了震荡导致的细胞破碎。
Biacore 作为分子互作检测金标准，已经广泛应用到生物制药的诸多环节，助力了一大批生物药
从研发走向上市。作为唯一被中国、美国、日本药典收录的分子互作检测技术，Biacore 也已广泛用
于 TCR-T，CAR-T 等新技术开发，为细胞治疗等创新疗法开发护航助力。
参考文献:
文章来源：Cytiva思拓凡 公众号